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    非酒精性脂肪肝（NAFLD）診斷與研究全攻略由普拉特澤生物動(dòng)物檢測(cè)平臺(tái)總結(jié)分享，動(dòng)物檢測(cè)平臺(tái)為廣大科研實(shí)驗(yàn)人員提供非酒精性脂肪肝外包實(shí)驗(yàn)服務(wù)，本篇介紹了非酒精性脂肪肝(NAFLD)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵評(píng)估指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)方案，包括常用動(dòng)物模型選擇、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)要點(diǎn)、組織病理學(xué)評(píng)估方法以及分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)，為NAFLD基礎(chǔ)研究提供方法學(xué)參考。
——下面將詳細(xì)介紹NAFLD動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵指標(biāo)和標(biāo)準(zhǔn)化操作流程。

一、NAFLD動(dòng)物模型的選擇策略

1. 常用動(dòng)物模型比較

2. 模型選擇考量因素

①研究目的匹配度：基礎(chǔ)機(jī)制研究vs藥物療效評(píng)估

②實(shí)驗(yàn)周期要求：短期篩選vs長(zhǎng)期慢性研究

③病理特征相關(guān)性：?jiǎn)渭冎咀僾s NASH伴纖維化

④代謝異常類型：肥胖相關(guān)vs糖尿病相關(guān)

二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與關(guān)鍵操作流程

1. 標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)方案

基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)框架：

動(dòng)物分組(對(duì)照組+模型組+干預(yù)組)

↓

適應(yīng)性喂養(yǎng)(1周)

↓

模型建立(4-24周)

↓

代謝指標(biāo)監(jiān)測(cè)(每周體重、每2周空腹血糖)

↓

終末實(shí)驗(yàn)(口服糖耐量/胰島素耐量試驗(yàn))

↓

樣本采集(血清+肝臟組織)

↓

指標(biāo)檢測(cè)(生化+組織學(xué)+分子生物學(xué))

2. 關(guān)鍵操作要點(diǎn)

• 飲食配制：HFD建議60%脂肪供能比，MCD飲食需嚴(yán)格質(zhì)量控制

• 環(huán)境控制：恒溫(22±2℃)、恒濕(50±10%)、12h/12h光暗周期

• 樣本采集：禁食4-6h后取材，肝臟分葉取樣避免區(qū)域差異

三、核心評(píng)估指標(biāo)體系

1. 代謝表型指標(biāo)

• 基礎(chǔ)代謝參數(shù)：

• 體重增長(zhǎng)曲線

• 空腹血糖(FBG)

• 胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)

• 口服糖耐量(OGTT)曲線下面積

• 血清生化指標(biāo)：

• 肝功能：ALT、AST、ALP

• 脂代謝：TG、TC、HDL-C、LDL-C

• 炎癥因子：TNF-α、IL-6、IL-1β

2. 肝臟病理學(xué)評(píng)估

組織學(xué)評(píng)分系統(tǒng)：

• 脂肪變分級(jí)：

• 0級(jí)：<5%

• 1級(jí)：5-33%

• 2級(jí)：34-66%

• 3級(jí)：>66%

• NAS評(píng)分系統(tǒng)：

• 脂肪變(0-3分)

• 小葉炎癥(0-3分)

• 肝細(xì)胞氣球樣變(0-2分)

• ≥5分診斷NASH

特殊染色技術(shù)：

• 油紅O染色(冷凍切片)：脂滴定量分析

• Sirius Red染色：膠原纖維沉積評(píng)估

• 免疫組化：α-SMA(星狀細(xì)胞活化標(biāo)志)

3. 分子機(jī)制研究指標(biāo)

• 脂代謝通路：SREBP-1c、PPARγ、ACC等蛋白表達(dá)

• 炎癥信號(hào)：NF-κB、TLR4通路激活狀態(tài)

• 纖維化標(biāo)志：α-SMA、Collagen I、TGF-β mRNA水平

• 氧化應(yīng)激：MDA含量、SOD/GSH-Px活性

四、實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制要點(diǎn)

1. 模型驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)：

• HFD模型：肝指數(shù)(肝重/體重)增加>50%

• MCD模型：NAS評(píng)分≥5分

• ob/ob小鼠：體重較野生型增加100%

2. 常見問題解決方案：

• 模型成功率低：嚴(yán)格飲食質(zhì)量控制，避免交叉污染

• 個(gè)體差異大：增加樣本量(每組n≥8)，隨機(jī)分組

• 病理評(píng)分不一致：采用雙盲法閱片，Kappa檢驗(yàn)一致性

3. 數(shù)據(jù)報(bào)告規(guī)范：

• 詳細(xì)記錄飲食配方、動(dòng)物周齡、飼養(yǎng)條件

• 提供代表性病理圖片(200×、400×)

• 標(biāo)注染色方法和抗體信息
  

• 
  

五、前沿技術(shù)與研究展望

1.新型模型系統(tǒng)：

• 人源化肝臟小鼠模型

• 類器官共培養(yǎng)系統(tǒng)

• 微生物組移植模型

  2.多組學(xué)整合分析：

• 肝臟轉(zhuǎn)錄組與代謝組關(guān)聯(lián)分析

• 單細(xì)胞測(cè)序解析NAFLD異質(zhì)性

• 空間轉(zhuǎn)錄組定位病理區(qū)域

  3.無創(chuàng)監(jiān)測(cè)技術(shù)：

• 小動(dòng)物超聲彈性成像

• 顯微CT肝臟脂肪定量

• 代謝籠長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)系統(tǒng)

結(jié)論與建議

建立標(biāo)準(zhǔn)化的NAFLD動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方案需要綜合考慮：

1. 研究目標(biāo)與模型病理特征的匹配度

2. 多維度評(píng)估體系的系統(tǒng)應(yīng)用

3. 實(shí)驗(yàn)過程的質(zhì)量控制措施

最佳實(shí)踐建議：

• 機(jī)制研究首選HFD或基因修飾模型

• 藥物評(píng)價(jià)推薦MCD或復(fù)合模型

• 結(jié)合影像學(xué)和病理學(xué)驗(yàn)證結(jié)果

• 遵循ARRIVE指南報(bào)告實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

好，今天關(guān)于非酒精性脂肪肝（NAFLD）

診斷與研究全攻略

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