小鼠腸炎造模操作步驟【腸炎造模外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
小鼠腸炎造模步驟由普拉特澤生物為大家總結(jié)分享。炎性腸病是由細菌、病毒或寄生蟲導(dǎo)致的一種慢性腸病,動物模型的構(gòu)建有助于了解腸炎的發(fā)病機制和發(fā)展過程,進一步指導(dǎo)腸炎的治療。普拉特澤生物病動物實驗平臺承接大小鼠腸炎模實驗外包多例,積累了大量的實操經(jīng)驗,今天咱們就來分享腸炎造模時最常見的模型——DSS模型造模步驟。
硫酸葡聚糖屬于葡聚糖的聚陰離子衍生物,由葡聚糖和氯黃酸的酯化反應(yīng)形成。其中含硫量約為17%,相當于葡聚糖分子的每個葡萄糖殘?zhí)侵衅骄?/span>1.9個硫酸基團。白色或淡黃色粉末。易溶于水,微溶于乙醇。 10%水溶液為無色或淡黃色澄清溶液。如需滅菌,防止降解,應(yīng)配成緩沖體系(如碳酸氫鈉)。自 1985 年首次報道采用葡聚糖硫酸鈉制備出倉鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型以來,已有大量研究證明,DSS 結(jié)腸炎模型與人類潰瘍性結(jié)腸炎相似。DSS 結(jié)腸炎模型的組織學(xué)特點、臨床表現(xiàn)、發(fā)病部位和細胞因子情況都與人類潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerativecolitisUC)極為相似。該模型的造模條件和操作方法簡單,造價便宜,重復(fù)性好,便于掌握和推廣;可根據(jù)實驗?zāi)康恼{(diào)整DSS 濃度和給藥時間,建立急性、慢性和急慢性交替性模型。
【小鼠腸炎造模的實驗操作方法】
通常用純水制成DSS溶液給予動物自由飲用造模。有時配合偶氫甲烷(AOM)聯(lián)合造模。采用不同的 DSS 濃度(W/V)、給藥時間和給藥頻率,可制成急性和慢性兩種結(jié)腸炎模型(IBD)。急性結(jié)腸炎模型常采用較高濃度DSS溶液和相對短的給藥時間建立。如:3%-5%DSS 溶液自由飲用 4-7 天。慢性結(jié)腸炎模型則可采用低濃度 DSS,長時間給藥建立。如給予大鼠1%DSS溶液自由飲用120天。
【急性腸炎小鼠造模步驟】
1、第一天稱重和標記小鼠
2、加DSS溶液灌滿小鼠籠內(nèi)的飲水槽,以5mLDSS溶液/小鼠/天加量,對照小鼠加等體積不含DSS的飲用水
3、第3天清空籠內(nèi)剩余的DSS飲用水,每兩天換一次重新裝滿DSS溶液
4、第8天清空籠內(nèi)剩余的DSS飲用水,換上不含DSS的無菌水
【慢性腸炎小鼠造模步驟】
1、按照急性結(jié)腸炎造模步驟進行到第3步
2、第8天清空籠子內(nèi)剩余的DSS溶液,換上不含 DSS的無菌水持續(xù)到14天
3、第22-26天重復(fù)急性結(jié)腸炎造模步驟
4、第 29 天清空籠子內(nèi)剩余的DSS溶液,換上不含DSS的無菌水持續(xù)到14天
5、第 43-47天重復(fù)急性結(jié)腸炎建模步驟
6、第50天用無菌水換掉籠內(nèi)剩余的DSS溶液
【腸炎造模注意事項】
1、腸炎模型需要控制好DSS劑量,動物未出現(xiàn)預(yù)期效果或死亡率較高,出現(xiàn)上述情況一般跟藥物劑量有關(guān);
2、一般實驗室構(gòu)建的為急性腸炎模型,不適宜做長期給藥實驗;
3、腸炎發(fā)作部位以結(jié)直腸最為明顯,后續(xù)取材檢測一般選擇結(jié)直腸段。
小鼠腸炎造模操作步驟我們就講解到這里啦,如果您也正在準備腸炎造模的話希望能給您到您一些幫助,有需要小鼠腸炎造模外包的話歡迎選擇普拉特澤生物~