肝纖維化動物造模步驟下篇【肝纖維化造模外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
肝臟纖維化動物造模實驗步驟下篇由普拉特澤生物動物實驗平臺為大家總結(jié)分享。肝纖維化動物模型可以幫助科研人員更加直觀、全面的了解肌纖維化發(fā)病原理與機制,為臨床的肝纖維化治療提供方法與思路。普拉特澤生物長期給廣大研究人員提供肝纖維化動物造模實驗代做服務(wù),造模方法多種,可根據(jù)研究目的進(jìn)行選擇。
我們在肝纖維化動物造模實驗步驟上篇講完了CCl4和二甲基亞硝胺兩種化學(xué)藥物誘導(dǎo)肝纖維化模型的實驗方法,感興趣的小伙伴可以跳回去復(fù)習(xí)哦,本文給大家分享的是另外兩種造模方法:膽管結(jié)扎致肝纖維化和營養(yǎng)性肝纖維化造模方法。
一、膽管結(jié)扎誘導(dǎo)肝纖維化動物模型
1、實驗準(zhǔn)備
雄性C57,BALB/c小鼠(10周齡左右)或雄性SD大鼠(200g左右)。器械:擴創(chuàng)鉤,鑷子,尖頭剪刀,持針鉗,圓針、角針,鈍性剪刀,刀柄,創(chuàng)巾,棉簽,剃毛刀,酒精棉球,碘伏,注射器,縫合線(3號)
2、膽管結(jié)扎操作步驟
(1)術(shù)前麻醉,固定;
(2)術(shù)部剃毛,擦碘伏,75%酒精脫碘,鋪創(chuàng)巾;
(3)沿腹中線剪開皮膚,鈍性剪刀分離皮下的脂肪和肌肉;
(4)皮膚上開到尖狀軟骨處,拉牽引線,生理鹽水沖洗腹腔,擴創(chuàng)鉤使皮膚兩側(cè)撐開;
(5)棉簽沾生理鹽水撥開肝臟、腸、胰等臟器,在肝臟底部尋找并暴露出膽管(大鼠沒有膽囊,在肝臟和十二指腸中間找,小鼠沿著膽囊和十二指腸找),膽管下可看到門靜脈血管,與門靜脈血管平行的透明黃色的為膽管。
如下圖所示:
(6)用鑷子撥開膽管覆蓋及周邊的脂肪(一定要剝離干凈周邊的脂肪,否則容易造成結(jié)扎線滑脫),找到后把鑷子伸到膽管下方撥開脂肪,絲線穿過鑷子,在膽管處打結(jié),可扎2道防止造模不成功,生理鹽水沖洗腹腔。
(7)將內(nèi)臟歸位,先把腹膜縫在一起,然后再將皮膚縫合。
(8)每天碘伏消毒,75%酒精亦可。
(9)對照組與結(jié)扎組操作一致,僅不扎線。
3、注意事項
(1)手術(shù)無菌操作,動物注意保溫。
(2)盡量縮短操作時間。
(3)手術(shù)操作后注意動物創(chuàng)口感染。
二、營養(yǎng)性肝纖維化
1、實驗動物、材料準(zhǔn)備
實驗動物:150-200g左右的SD大鼠。
實驗材料:高脂、高膽堿、低蛋白飼料或低蛋白、低蛋氨酸、加乙硫氨酸飼料。
2、實驗方法
每周更換兩次特種飼料,持續(xù)8周以上。
PS:此方法造模耗時長,成模率低,一般用于非酒精性脂肪肝病研究。
好啦,膽管結(jié)扎和營養(yǎng)性誘導(dǎo)肝纖維化就講完啦,相比較于科學(xué)研究,醫(yī)藥研發(fā)企業(yè)對于營養(yǎng)性肝纖維化模型的研究和應(yīng)用更為深入,如果您也有肝纖維化動物模型外包或購買的需求!歡迎選擇普拉特澤生物~