關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型造模步驟【關(guān)節(jié)炎模型外包】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
關(guān)節(jié)炎模型造模實(shí)驗(yàn)步驟由普拉特澤生物分享,上期我們分享了《關(guān)節(jié)炎造模的造模方法》,骨關(guān)節(jié)炎以進(jìn)行性的關(guān)節(jié)軟骨退變、滑膜炎癥、軟骨下骨改變和骨贅形成為特征,關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型可以直觀研究關(guān)節(jié)炎病的致病機(jī)制發(fā)病原因等,是臨床研究關(guān)節(jié)炎的重要方法。普拉特澤生物動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)長(zhǎng)期承接關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型外包實(shí)驗(yàn),提供各種類型的關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型外包服務(wù),本文就來跟大家一起學(xué)習(xí)三種常用的關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型造模方法:
一、前交叉韌帶橫斷模型關(guān)節(jié)炎模型
交叉韌帶是防止脛骨移位、維持膝關(guān)節(jié)穩(wěn)定性的重要結(jié)構(gòu)之一,與膝關(guān)節(jié)屈曲伸直位、肌肉收縮狀態(tài)、負(fù)重或非負(fù)重區(qū)都有關(guān)系。單純前交叉韌帶離斷術(shù)可以改變關(guān)節(jié)前向穩(wěn)定,增大關(guān)節(jié)間活動(dòng)度,增加骨摩擦,加快關(guān)節(jié)退行性變進(jìn)程。
造模過程(以大鼠為例):
1、大鼠按劑量腹腔注射10%的水合氯醛進(jìn)行麻醉。
2、麻醉后大鼠右后肢備皮消毒,在膝關(guān)節(jié)炎內(nèi)側(cè)做一個(gè)縱向約3cm的切口,沿髕骨韌帶向上輕開一個(gè)小口,剪開肌肉,屈膝,將髕骨外翻。暴露交叉韌帶后,剪斷前交叉韌帶。
3、然后進(jìn)行抽屜實(shí)驗(yàn),確認(rèn)前交叉韌帶是否完全斷離,逐層縫合傷口。
二、關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射藥物關(guān)節(jié)炎模型
關(guān)節(jié)對(duì)照組與模型組大鼠在實(shí)驗(yàn)過程中未發(fā)生死亡或其它異常情況,注射MSU造模2個(gè)月后,取大鼠膝關(guān)節(jié)骨組織固定,具體模型構(gòu)建情況還需以病理檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)。
1、購(gòu)進(jìn)的SD大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3天,期間正常飲水和喂食;
2、實(shí)驗(yàn)前一天對(duì)大鼠進(jìn)行禁食16h,10%水合氯醛腹腔注射麻醉(0.4ml/100g);
3、剪去大鼠膝關(guān)節(jié)處毛發(fā),暴露膝關(guān)節(jié)處皮膚,將配制好的MSU溶液稀釋至合適濃度,使用一次性注射器將5mg/50uL MSU注射到模型組大鼠的膝關(guān)節(jié)腔中,對(duì)照組注射同等體積的生理鹽水;
4、注射完成后停頓3秒左右,緩慢將注射器拔出,按壓注射點(diǎn)數(shù)秒,將各組大鼠放回籠內(nèi),正常飼養(yǎng);
5、組織取材,每3天觀察各組大鼠狀態(tài)是否出現(xiàn)異常,若無異常,2個(gè)月后處死各組大鼠,取膝關(guān)節(jié)固定保存。
三、關(guān)節(jié)制動(dòng)法關(guān)節(jié)炎模型
目前常采用的肢體制動(dòng)體位有伸直位、屈曲位、中間位等對(duì)模型動(dòng)物進(jìn)行關(guān)節(jié)的機(jī)械性制動(dòng),最為經(jīng)典的是Videman造模法。
造模步驟(以兔子為例):
1、動(dòng)物適應(yīng)性喂養(yǎng)動(dòng)物房12h-12h晝夜交替,保證兔子自由飲水、進(jìn)食,溫度23-25℃,適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。
2、兔子耳緣備皮,耳緣靜脈注射7%水合氯醛麻醉。
3、兔子后肢備皮去毛,牽拉右腿使右膝關(guān)節(jié)處于伸直位,將兔右后肢于腹股溝以下1.5cm至裸關(guān)節(jié)下3cm(趾端)先包裹醫(yī)用無菌紗布,3層左右,石膏布浸水2-3min,小心擰干水分。
4、將處理好后的石膏布于腹股溝以下1.5cm至裸關(guān)節(jié)下3cm(趾端)沿紗布繼續(xù)包裹(不可過松、過緊),約4-5層,最后用醫(yī)用膠帶纏裹固定。
5、等石膏干硬(冬季可用吹風(fēng)機(jī)加熱)后,將綁好后的兔子放回兔籠。
6、制動(dòng)2周軟骨病理呈早期OA改變,固定時(shí)間越長(zhǎng),病理程度越重。制動(dòng)6周,造模關(guān)節(jié)X線出現(xiàn)關(guān)節(jié)間隙狹窄、唇樣增生等典型中晚期OA特征。
7、取材拍照觀察實(shí)驗(yàn)樣本。
好啦,那關(guān)于骨關(guān)節(jié)炎模型的造模步驟就講完啦,希望可以幫到您~如果您覺得自己造模太繁雜有關(guān)節(jié)炎模型代做的需求,歡迎選擇普拉特澤生物~