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  亞硫酸氫鈉測序法（BSP）實驗介紹由普拉特澤生物為大家總結分享。亞硫酸氫鹽測序是檢測細胞或組織中全部染色體DNA上甲基化情況的技術。普拉特澤生物表達檢測平臺專業(yè)提供亞硫酸氫鈉測序實驗外包服務，本文我們先來看看亞硫酸氫鈉測序法的實驗介紹~

  亞硫酸氫鈉測序法（BSP）是基于亞硫酸氫鹽能使DNA中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶脫氨基轉變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不變，行PCR擴增所需片段，則尿嘧啶全部轉化成胸腺嘧啶，然后對PCR產物進行高通量測序。通過分析不同樣品之間的甲基化差異，可研究DNA甲基化水平對基因表達的調控。

  直接測序法是建立在 MSP 基礎上進一步深入研究 CpG 島各個位點甲基化情況的方法。重亞硫酸鹽使 DNA 中未發(fā)生甲基化的胞嘧啶脫氨基轉變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不變，行PCR 擴增(引物設計時盡量避免有 CpG，以免受甲基化因素的影響)所需片段，則尿嘧啶全部轉化成胸腺嘧啶。最后，對PCR產物進行測序，并且與未經處理的序列比較，判斷是否CpG位點發(fā)生甲基化。

  亞硫酸氫鈉測序法是一種可靠性及精確度很高的方法，能明確目的片段中每一個 CpG 位點的甲基化狀態(tài)。在尋找有意義的關鍵性 CpG 位點上，有其他方法無法比擬的優(yōu)點。測序法以 CpG 島兩側不含 CpG 點的一段序列為引物配對區(qū)，所以能夠同時擴增出甲基化和非甲基化靶序列。它的不足是耗費時間和耗資過多，至少要測序 10 個以上的克隆才能獲得可靠數(shù)據(jù)，同時需要大量的克隆及質粒提取測序，過程較為繁瑣、昂貴。

  亞硫酸氫鈉測序法的簡單實驗流程如下：

        1、引物設計與測試；

        2、基因組提??；

        3、亞硫酸氫鈉修飾DNA并純化回收修飾產物；

        4、PCR擴增、產物回收并連入T載；

        5、測序分析；

        6、甲基化分析與數(shù)據(jù)統(tǒng)計。

  亞硫酸氫鈉測序法我們先簡單介紹到這里啦，下期咱們分步詳細講解BSP實驗的實驗步驟，如果您有還有關于BSP實驗的問題或有BSP檢測外包的需求歡迎隨時聯(lián)系普拉特澤~