HE檢測實(shí)驗(yàn)報(bào)告(三)
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
普拉特澤生物為廣大生命科學(xué)研究人員提供HE染色,可根據(jù)實(shí)方案的要求選擇不同的檢測方法,本文就跟大家一起繼續(xù)探究HE染色實(shí)驗(yàn)報(bào)告中小鼠肺組織樣本染色情況。
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>
對(duì)組織樣本進(jìn)行HE染色。
一、實(shí)驗(yàn)樣本及分組
樣本:小鼠肺
二、結(jié)果
圖1 HE染色圖 40X
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)論
樣本中細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色。細(xì)胞質(zhì)被伊紅染成深淺不同的粉紅色至深紅色。對(duì)比鮮明??梢郧逦^察到組織形態(tài),符合HE染色結(jié)果的要求。
五、實(shí)驗(yàn)材料
1.主要耗材
2.主要試劑
六、實(shí)驗(yàn)原理
蘇木精-伊紅染色法簡稱HE染色法,是最常用的染色方法。蘇木精(hematoxylin)是陽離子染料,能夠?qū)⒓?xì)胞核內(nèi)的嗜堿性物質(zhì)染成藍(lán)紫色。伊紅(eosin)是陰離子染料,能夠?qū)⒓?xì)胞質(zhì)和膠原纖維等染成粉紅色。
七、實(shí)驗(yàn)步驟
1.脫蠟
1) 70℃烤片5 min;
2) 二甲苯(I)中脫蠟10 min;
3) 二甲苯(II)中脫蠟10 min;
4) 100%乙醇(I)中5 min洗去二甲苯;
5) 100%乙醇(II)中5 min洗去二甲苯;
2.水化
1) 95%乙醇中水化5 min;
2) 85%乙醇中水化5 min;
3) 75%乙醇中水化5 min;
4) 蒸餾水中水化待用;
3.染色
1) 蘇木素染色10 min;
2) 流水沖洗2 min;
3) 1%鹽酸酒精分化2 s;
4) 流水沖洗切片15 min;
5) 蒸餾水過洗1-2 s;
6) 伊紅染色10 min;
4.分化
1) 根據(jù)顏色深淺用80%的乙醇分化;
2) 85%乙醇脫水5 min;
3) 95%乙醇脫水5 min;
4) 無水乙醇脫水10 min;
5) 無水乙醇脫水10 min;
5.透明
1) 二甲苯(I)透明10 min;
2) 二甲苯(II)再次透明10 min;
6.封片
在石蠟切片的中央滴加一滴中性樹膠,蓋上蓋玻片封固。
7.鏡檢
顯微鏡下觀察拍照。
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