裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)常見問題處理方法
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
大家好!今天 普拉特澤生物 跟大家一起學(xué)習(xí)的是裸鼠皮下成瘤操作過程中容易遇到的問題和處理方法。普拉特澤生物-動物實(shí)驗(yàn)平臺專業(yè)承接各類動物成瘤、造模實(shí)驗(yàn)代做,本文由技術(shù)根據(jù)多年實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)而來,還不了解什么是裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)的同學(xué)可以回去了解,循序漸進(jìn)的學(xué)習(xí)哦。
裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)
那現(xiàn)在我們就來看看,裸鼠皮下成瘤操作中有哪些容易發(fā)生的問題和解決的方法吧!
1、這個(gè)實(shí)驗(yàn)為什么用裸鼠而不用普通的老鼠或者小白鼠?
裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)用的裸鼠,最大的特點(diǎn)是沒有胸腺等免疫器官,它的免疫力幾乎為0,對腫瘤細(xì)胞沒有免疫作用,易于成瘤。
自然狀態(tài)下的老鼠和小白鼠有完整的免疫系統(tǒng)。免疫系統(tǒng)有免疫防御、免疫自穩(wěn)、免疫監(jiān)視三大生理功能,并通過免疫識別和免疫排斥攻擊兩大生理反應(yīng)起作用。具有完整免疫系統(tǒng)的老鼠和小白鼠,會通過免疫識別反應(yīng)來識別自己與非己,發(fā)現(xiàn)注入的腫瘤細(xì)胞這種非己抗原后,會啟動免疫排斥攻擊反應(yīng)進(jìn)行殺滅,這樣腫瘤就很難形成,實(shí)驗(yàn)就難以進(jìn)行下去。
2、小鼠瘤子長起來又消失?
腫瘤塊先縮小,后變大很常見,很可能是炎癥反應(yīng),腫瘤細(xì)胞被小鼠自身吸收,繼續(xù)觀察腫瘤細(xì)胞吸收之后是否經(jīng)過幾周還能長出來,長不起來建議換鼠。
3、如何抓牢裸鼠?
可以用左手拇指和食指捏緊裸鼠頸背部皮膚,小拇指夾住裸鼠尾巴,然后進(jìn)行接種。
4、是否可以在一只小鼠進(jìn)行多個(gè)點(diǎn)荷瘤?
不可以,一只老鼠就只能接種一個(gè)點(diǎn)。因?yàn)橐粋€(gè)老鼠身上有多個(gè)腫瘤塊的情況下,可能會相互影響。
5、均一性很差,腫瘤體積差距較大?
如果荷瘤分組發(fā)現(xiàn)小鼠腫瘤體積差距很大,這可能跟小鼠周齡及接種細(xì)胞量不一致導(dǎo)致,建議重新做實(shí)驗(yàn)分組。
6、腫瘤長不出來是怎么回事?
第一:腫瘤生長周期很慢,一周開始生長腫塊,大約需要1~2個(gè)月才能長成腫瘤。
第二:可能是細(xì)胞狀態(tài)差,活力不好,或是腫瘤細(xì)胞不易成瘤,需加入Matrigel輔助或增大接種量或更換細(xì)胞系;
第三:一方面可能是小鼠周齡太大,或小鼠免疫排斥,建議更換免疫缺陷程度更大的小鼠(Nod-scid小鼠,NOG小鼠>Nude裸鼠)
7、腫瘤體積相差很大,大小不一?
首先,不是所有的腫瘤都能夠長得均一形態(tài)規(guī)則。
其次,荷瘤分組發(fā)現(xiàn)小鼠腫瘤體積差距很大,這可能跟小鼠周齡及接種細(xì)胞量不一致導(dǎo)致,建議重新做實(shí)驗(yàn)分組。
最后,一般構(gòu)建腫瘤模型,裸鼠主要保證周齡,周齡小一點(diǎn)好。
8、是否應(yīng)用免疫抑制劑加速腫瘤生長?
如果裸鼠荷瘤不生長,可以參考文獻(xiàn),用免疫抑制劑如環(huán)磷酰胺(抑制裸鼠NK細(xì)胞活性)促進(jìn)生長;不過最好不要為了縮短造模周期來加速生長,因?yàn)榭赡軙斐蓾€,這樣就不得不中止實(shí)驗(yàn)。所以一般情況下,應(yīng)盡量符合細(xì)胞系本身的生長特性,不應(yīng)過多地人為的干擾。
最后,一般構(gòu)建腫瘤模型,裸鼠主要保證周齡,周齡小一點(diǎn)好。總之,裸鼠成瘤概括來說就是,大膽的接種,勤觀察,勤記錄,一定要仔細(xì)記錄!
那關(guān)于裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)的所有內(nèi)容我們就講完啦,還有更多不懂得歡迎留言給客服,技術(shù)會第一時(shí)間解答的哦~我們下個(gè)實(shí)驗(yàn)見!