PAS檢測實驗報告【小鼠腎】
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
普拉特澤生物承接PAS染色法等病理染色相關(guān)服務(wù)上萬例,積累了操作大量經(jīng)驗,為大家詳細(xì)分享PAS染色的實驗操作步驟與染色結(jié)果分析,同時為廣大科研工作者開展線上的理論培訓(xùn)與線下實操,可承接染色實驗外包服務(wù)。
一、實驗?zāi)康?/span>
對組織樣本進行PAS染色。
二、實驗樣品及分組
樣本:小鼠腎
三、實驗結(jié)果
圖1 PAS染色示意圖100×
四、實驗結(jié)論
PAS反應(yīng)陽性物質(zhì) 紅色或紫紅色
細(xì)胞核 藍色
細(xì)胞質(zhì) 深淺不一的紅色
五、實驗材料
1. 主要儀器
2.主要試劑
六、實驗原理
糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一,氧化劑能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?,醛與Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物,產(chǎn)生紫紅色。PAS技術(shù)常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì),以及軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。
七、方法步驟
(1) 常規(guī)固定、脫水、包埋。
(2) 石蠟切片脫蠟入蒸餾水;然后將冰凍切片直接入蒸餾水。
(3) 自來水沖洗2-3 min,再用蒸餾水浸洗2次。
(4) 置于氧化劑中,室溫(25-30℃)放置5-8 min,一般不宜超過10 min。
(5) 自來水沖洗1次,再用蒸餾水浸洗2次。
(6) 樣本放入Schiff Reagent,置于室溫(25-30℃)陰暗處,浸染10-20 min。
(7) 自來水沖洗10 min。
(8) 樣本置于蘇木素染色液中,染細(xì)胞核1-2 min。
(9) 酸性分化液分化2-5 s。
(10) 自來水沖洗10-15 min后,更換雙蒸水清洗,使其返藍。
(11) 逐級常規(guī)乙醇脫水。二甲苯透明,中性樹膠封固。
顯微鏡下觀察拍照
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