深入了解MASSON染色:原理、步驟與實例
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
MASSON染色是一種在組織學(xué)和病理學(xué)研究中廣泛應(yīng)用的染色技術(shù),主要用于顯示和區(qū)分組織中的膠原纖維和肌纖維。這種染色方法以其獨特的原理和步驟,為我們提供了觀察和解析組織微觀結(jié)構(gòu)的有力工具。 MASSON染色實驗由普拉特澤生物病理檢測平臺總結(jié)分享,病理檢測平臺為廣大科研實驗人員提供MASSON染色實驗等其他染色實驗服務(wù),先一起來深入了解MASSON染色:原理、步驟~
一、MASSON染色的原理
MASSON染色的原理主要基于陰離子染料分子的大小和組織滲透性的關(guān)系。染料分子的大小決定了其能夠滲透進入的組織類型。小分子量的染料能夠穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織,而大分子量的染料則只能進入結(jié)構(gòu)疏松、滲透性高的組織。在MASSON染色中,由于肌纖維間隙較小,麗春紅等小分子染料能夠滲透其中并染色,使其呈現(xiàn)紅色;而膠原纖維間隙較大,大分子量的苯胺藍等染料能夠進入并染色,使其呈現(xiàn)藍色或綠色。這種染色方式使得我們能夠清晰地觀察到并區(qū)分這兩種不同的組織成分。
二、MASSON染色的步驟包括:
Step1:石蠟切片脫蠟至水,使組織切片能夠充分與染色劑接觸。
Step2:進行鉻化處理或去汞鹽沉淀,這一步對于甲醛固定的組織可以省略。
Step3:使用自來水和蒸餾水依次清洗切片,去除多余的處理液。
Step4:使用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精液染核,使細胞核著色。
Step5:充分水洗切片,如過染可用鹽酸酒精分化,以調(diào)整染色深淺。
Step6:使用Masson麗春紅酸性復(fù)紅液染色,使肌纖維呈現(xiàn)紅色。
Step7:使用2%冰醋酸水溶液浸洗切片,以優(yōu)化染色效果。
Step8:使用1%磷鉬酸水溶液分化,使膠原纖維和其他組織成分區(qū)分更明顯。
Step9:使用苯胺藍或光綠液染色,使膠原纖維呈現(xiàn)藍色或綠色。
Step10:再次使用0.2%冰醋酸水溶液浸洗切片,使色調(diào)更加清晰鮮艷。
Step11:最后,通過酒精脫水、二甲苯透明和中性樹膠封固等步驟,完成整個染色過程。
三、以下是一個Masson染色的示例過程:
→預(yù)處理:獲取包含組織的石蠟切片,確保切片已經(jīng)去蠟并準(zhǔn)備好染色。
→染色處理:
①將去蠟的切片放入預(yù)熱的酸性fuchsin溶液中,將其染成紅色。根據(jù)實驗需求,可以調(diào)整染色時間和溫度。
②使用鹽酸或酸性乙醇溶液對切片進行漂洗,以去除多余的染料。
③將切片放入蘇木精溶液中,使細胞核和肌肉呈黃色或淡綠色。
④脫水和固定:將切片放入逐漸增濃度的酒精溶液(例如70%、95%、100%)中,逐漸脫水。然后,將切片放入透明劑中(如井田氏溶劑),使其透明并固定。
⑤封片和觀察:將切片放在載玻片上,加入透明封片劑,并蓋上玻片。使用顯微鏡觀察和分析染色后的組織切片,注意觀察膠原纖維的紅色染色和細胞核及肌肉的顏色。
人腎組織
小鼠纖維化
總之,MASSON染色是一種重要的組織學(xué)染色方法,通過其獨特的染色原理和步驟,可以實現(xiàn)對組織纖維結(jié)構(gòu)的清晰展示和深入分析。在實際應(yīng)用中,MASSON染色為醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷提供了有力的支持。
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