顶级嫩模啪啪呻吟不断好爽|尹人大香蕉精品视频|飘雪电影网在线播放观看 |人人妻人人澡人人人爽人人dvd

        大家好，今天跟大家一起學(xué)習(xí)的是石蠟切片的詳細(xì)制作步驟，石蠟切片的制作方法由普拉特澤生物為大家總結(jié)分享。石蠟切片的制作好壞直接影響后期的樣本觀察或檢測(cè)。普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)在承接大量的石蠟切片外包服務(wù)后，總結(jié)出自己的操作經(jīng)驗(yàn)，旨在教會(huì)病理小白們學(xué)會(huì)、學(xué)精石蠟切片的制作。

        上期我們?cè)?a style='text-decoration: underline;color: rgb(84, 141, 212);' style="text-decoration: underline;color: rgb(84, 141, 212);" href="http://kimsgames.com/news/view/xinshoubikandeshilaqiepianshiy.html" target="_blank">石蠟切片的實(shí)驗(yàn)介紹中簡(jiǎn)單過(guò)了一遍操作步驟，主要是：取材、固定、洗滌和脫水、透明、浸蠟、包埋、切片與貼片、脫蠟、染色、脫水、透明、封片。現(xiàn)在我們就來(lái)一個(gè)一個(gè)看：

        石蠟切片制作第一步：取材

        應(yīng)根據(jù)要求選取材料來(lái)源及部位。材料必須新鮮，擱置時(shí)間過(guò)久則產(chǎn)生蛋白質(zhì)分解變性，導(dǎo)致細(xì)胞自溶及細(xì)菌的滋生，而不能反映組織活體時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

        石蠟切片制作第二步：固定

        用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)藥液——固定液浸漬切成小塊的新鮮材料，迅速凝固或沉淀細(xì)胞和組織中的物質(zhì)成分、終止細(xì)胞的一切代謝過(guò)程、防止細(xì)胞自溶或組織變化，盡可能保持其活體時(shí)的結(jié)構(gòu)。固定能使組織硬化，有利于切片的進(jìn)行，而且也有媒浸作用，有利于組織著色。固定液的種類(lèi)很多，其對(duì)組織的硬化收縮程度以及組織內(nèi)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類(lèi)等物質(zhì)的作用各不相同。10%福爾馬林（4%甲醛）或10%磷酸緩沖福爾馬林是病理切片常規(guī)使用的固定液，不僅適用于常規(guī)蘇木精-伊紅（HE）染色，還可以用于組織學(xué)有關(guān)的其他技術(shù)的切片染色。固定液的用量通常為材料塊的20倍左右，固定時(shí)間則根據(jù)材料塊的大小及松密程度以及固定液的穿透速度而定，可以從1小時(shí)至數(shù)天，通常為1小時(shí)至24小時(shí)。

        石蠟切片制作第三步：洗滌與脫水

        固定后的組織材料需除去留在組織內(nèi)的固定液及其結(jié)晶沉淀，否則會(huì)影響后期的染色效果。該步驟稱(chēng)作洗滌多數(shù)用流水沖洗；使用含有苦味酸的固定液固定的則需用酒精多次浸洗；使用酒精或酒精混合液固定的組織，則不必洗滌，可直接進(jìn)行脫水。固定后或洗滌后的組織內(nèi)充滿水分，若不除去水分則無(wú)法進(jìn)行以后的透明、浸蠟與包埋處理，原因在于透明劑多數(shù)是苯類(lèi)，苯類(lèi)和石蠟均不能與水相溶合，水分不能脫盡，苯類(lèi)無(wú)法浸入。酒精為常用脫水劑，它既能與水相混合，又能與透明劑相混。為了減少組織材料的急劇收縮，應(yīng)使用從低濃度到高濃度遞增的順序進(jìn)行，通常從30%或50%酒精開(kāi)始，經(jīng)70%、85%、95%直至純酒精（無(wú)水乙醇），每次時(shí)間為1～數(shù)小時(shí)，如不能及時(shí)進(jìn)行各級(jí)脫水，材料可以放在70%酒精中保存，因高濃度酒精易使組織收縮硬化，不宜處理過(guò)久。正丁醇、叔丁醇、丙酮及二氧陸環(huán)等也可做脫水劑。

        石蠟切片制作第四步：透明

        純酒精不能與石蠟相溶，還需用能與酒精和石蠟相溶的媒浸液，替換出組織內(nèi)的酒精。材料塊在這類(lèi)媒浸液中浸漬，出現(xiàn)透明狀態(tài)，此液即稱(chēng)透明劑，透明劑浸漬過(guò)程稱(chēng)透明。常用的透明劑有二甲苯、苯、氯仿、正丁醇等，各種透明劑均是石蠟的溶劑。通常組織先經(jīng)純酒精和透明劑各半的混合液浸漬1～2小時(shí)，再轉(zhuǎn)入純透明劑中浸漬。透明劑的浸漬時(shí)間則要根據(jù)組織材料不同的組織類(lèi)型而定，如果透明時(shí)間過(guò)短，則透明不徹底，石蠟難于浸入組織；透明時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則組織硬化變脆，就不易切出完整切片，最長(zhǎng)為數(shù)小時(shí)。

        石蠟切片制作第五步：浸蠟與包埋

        用石蠟取代透明劑，使石蠟浸入組織而起支持作用。通常先把組織材料塊放在熔化的石蠟和二甲苯的等量混合液浸漬1～2小時(shí)，浸蠟應(yīng)在高于石蠟熔點(diǎn)3℃左右的溫箱中進(jìn)行，以利石蠟浸入組織內(nèi)。浸蠟后的組織材料塊放在裝有蠟液的容器中（擺好在蠟中的位置），待蠟液表層凝固即迅速放入冷水中冷卻，即做成含有組織塊的蠟塊。容器可用光亮且厚的紙折疊成紙盒或金屬包埋框盒。如果包埋的組織塊數(shù)量多，應(yīng)進(jìn)行編號(hào)，以免差錯(cuò)。石蠟熔化后應(yīng)在蠟箱內(nèi)過(guò)濾后使用，以免因含雜質(zhì)而影響切片質(zhì)量，且可能損傷切片刀。通常石蠟采用熔點(diǎn)為56～58℃或60～62℃兩種，可根據(jù)季節(jié)及操作環(huán)境溫度來(lái)選用。

        石蠟切片制作第六步：切片

        包埋好的蠟塊用刀片修成規(guī)整的四棱臺(tái)，以少許熱蠟液將其底部迅速貼附于小木塊上，夾在輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)的蠟塊鉗內(nèi)，使蠟塊切面與切片刀刃平行，旋緊。切片刀的銳利與否、蠟塊硬度是否適當(dāng)都直接影響切片質(zhì)量，可用熱水或冷水等方法適當(dāng)改變蠟塊硬度。通常切片厚度為4～7微米，切出一片接一片的蠟帶，用毛筆輕托輕放在紙上。

        石蠟切片制作第七步：貼片與烤片

        用粘附劑將展平的蠟片牢附于載玻片上，以免在以后的脫蠟、水化及染色等步驟中二者滑脫開(kāi)。粘附劑是蛋白甘油。首先在潔凈的載玻片上涂抹薄層蛋白甘油，再將一定長(zhǎng)度蠟帶（連續(xù)切片）或用刀片斷開(kāi)成單個(gè)蠟片于溫水（45℃左右）中展平后，撈至玻片上鋪正，或直接滴兩滴蒸餾水于載玻片上，再把蠟片放于水滴上，略加溫使蠟片鋪展，最后用濾紙吸除多余水分，將載玻片放入45℃溫箱中干燥，也可在37℃溫箱中干燥，但需適當(dāng)延長(zhǎng)時(shí)間。

        好啦，那么石蠟切片的詳細(xì)制流程我們就講完啦，這么詳細(xì)大家應(yīng)該都學(xué)會(huì)了吧，復(fù)雜而簡(jiǎn)單的操作步驟如果您覺(jué)得麻煩的話可以交給我們普拉特澤生物的病理平臺(tái)技術(shù)哦，有更多不懂得也歡迎留言，一定竭誠(chéng)回復(fù)~