透射電鏡實驗樣品制備技巧
來源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學整體課題外包平臺
在材料科學、生物學以及化學等研究領域中,透射電子顯微鏡(TEM)已成為觀察納米級至原子級結構的重要工具。然而,高質(zhì)量的透射電鏡圖像離不開精心制備的樣品。 透射電鏡實驗樣品制備技巧由普拉特澤生物為大家總結分享,普拉特澤生物病理實驗平臺專業(yè)承接免疫熒光/IF實驗外包、、組織芯片等組織染色實驗代做服務,積累專業(yè)豐富的實驗操作經(jīng)驗。本文將詳細介紹透射電鏡實驗樣品制備的技巧,幫助研究人員確保實驗結果的準確性和可靠性。
一、透射電鏡實驗樣品制備的重要性
在透射電鏡實驗中,樣品的制備是獲得高質(zhì)量圖像的關鍵。一個成功的樣品制備過程應確保樣品具備以下特點:
→樣品厚度適宜:透射電鏡要求樣品厚度小于100nm,以確保電子束能夠穿透樣品,形成清晰的圖像。
→樣品結構完整:制備過程中應盡量避免對樣品結構的破壞,保持其原有的微觀形貌。
→樣品穩(wěn)定性好:在高真空環(huán)境下,樣品應保持穩(wěn)定,避免發(fā)生變形或分解。
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二、樣品預處理
樣品預處理是確保樣品質(zhì)量和觀察效果的關鍵步驟。對于固體樣品,可能需要通過切割、拋光或電解拋光等方法來得到平滑的表面。對于液體或懸浮液樣品,則需要將其稀釋至適當?shù)臐舛?,以便在網(wǎng)格上形成均勻的樣品層。
圖2
三、透射電鏡實驗樣品制備技巧
選擇合適的樣品制備方法:
(1)納米粉末樣品制備:將納米顆粒均勻分散在支持膜上,確保粉末顆粒不團聚、不重疊。可采用超聲波分散器將粉末在分散介質(zhì)中分散成懸浮液,然后用滴管滴在覆蓋有支持膜的電鏡銅網(wǎng)上,待其干燥后送入電鏡分析。
(2)塊狀樣品制備:對于生物組織、高分子和無機粉體等材料,可采用超薄切片方法。首先,將待觀察的試樣切割成薄片,再經(jīng)機械減薄拋光等過程預減薄至30-40μm的薄膜。然后,將薄膜鉆取或切取成尺寸為2.5-3mm的小片,裝入離子轟擊減薄裝置進行離子轟擊減薄和離子拋光。
(3)保持樣品穩(wěn)定性
在制備過程中,應注意避免樣品受到污染和損傷。對于含有水分或其他易揮發(fā)物的樣品,應先進行烘干處理。對于磁性試樣,要預先去磁,以免觀察時電子束受到磁場的影響。
(4)薄片形狀整理
在獲得薄片后,需要對其形狀和表面進行整理。這包括使用不同的研磨和拋光方法將薄片的形狀和表面進行調(diào)整,以確保樣品的平滑度和一致性。此外,還需要在薄片上標記位置和方向等信息以便于后續(xù)觀察和分析。
(5)提高樣品反差
為了提高TEM圖像的對比度,可以采用電子染色、投影、負染色等技術對樣品進行處理。例如,使用含有重金屬元素的固定劑(如四氧化鋨)進行固定,可以增強散射電子的能力,提高細胞結構的反差。
四、結語
通過掌握透射電鏡實驗樣品制備的技巧,我們可以獲得高質(zhì)量的TEM圖像,為科研工作的深入開展提供有力支持。希望本文的內(nèi)容能對你的研究工作有所幫助,讓我們一起在科研道路上不斷進步!好啦,那關于透射電鏡實驗樣品制備技巧我們就介紹到這里啦,還有關于透射電鏡更多問題咨詢的歡迎留言哦,技術小姐姐會第一時間給到最專業(yè)的回復噠!還有需要透射電鏡代做服務請認準咱們普拉特澤哦!