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    前兩篇我們總結了MCD飲食模型 vs 高脂飲食模型、非酒精性脂肪肝（NAFLD）動物模型評價指標等常見問題，今天來學習如何選擇NAFLD/NASH動物模型——關鍵評價指標與實驗設計全指南希望大家引以為鑒，能夠避免這些普拉特澤為大家踩過的坑。

上篇：MCD飲食模型 vs 高脂飲食模型：非酒精性脂肪肝模型病理指標對比分析

下篇：非酒精性脂肪肝（NAFLD）動物模型評價指標

鏈接奉上，大家快點踩著普拉特澤生物的肩膀去摘蘋果吧！那現(xiàn)在我們來接著進入今天的話題：

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)及其進展型非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的研究已成為肝臟疾病領域的重點，而選擇合適的動物模型是研究成功的關鍵第一步。
本文將全面解析NAFLD/NASH模型的分類體系、選擇策略、關鍵評價指標以及實驗設計要點，幫助研究者建立高效可靠的研究方案。

1）NAFLD/NASH模型分類及選擇策略

1. 飲食誘導模型：模擬人類代謝特征

▲高脂飲食(HFD)模型：

造模時間：16-24周可誘導單純脂肪變性，32周以上出現(xiàn)NASH特征

優(yōu)點：最接近人類代謝綜合征特征

缺點：纖維化進展緩慢，需結合其他刺激

▲蛋氨酸膽堿缺乏(MCD)模型：

造模時間：4-8周即可形成顯著NASH

優(yōu)點：造模周期短，炎癥和纖維化明顯

缺點：伴隨體重下降，與人類代謝特征不符

▲高脂高果糖高膽固醇(HFHFrHC)模型：

造模時間：20-30周形成典型NASH伴纖維化

優(yōu)點：最接近人類飲食結構

缺點：成本高，周期長

2） 基因修飾模型：研究特定通路機制

ob/ob和db/db小鼠：

特征：自發(fā)肥胖和胰島素抵抗

適用：早期NAFLD研究

局限：單獨使用難以形成顯著NASH和纖維化

MAT1A-KO小鼠：

特征：自發(fā)肝脂肪變性和氧化應激

優(yōu)勢：研究氧化應激在NASH中的作用

造模時間：6個月出現(xiàn)纖維化

3）復合模型：加速疾病進展

▲STAM模型：

方法：新生期鏈脲佐菌素注射+HFD喂養(yǎng)

特點：16周內完成脂肪變性-NASH-肝細胞癌全過程

應用：抗癌藥物篩選

▲DIAMOND小鼠：

特征：高脂高果糖飲食誘導

優(yōu)勢：高度模擬人類NASH組織學特征

評價：目前最接近人類NASH的模型之一

3）模型選擇的關鍵考量因素

1. 研究目的導向選擇

機制研究：

早期NAFLD：ob/ob小鼠+HFD(8-12周)

炎癥機制：MCD模型(4-6周)

纖維化研究：HFHFrHC模型(24-30周)

藥物開發(fā)：

抗炎藥物：MCD模型

抗纖維化藥物：CCL4+HFD復合模型

代謝調節(jié)藥物：DIAMOND小鼠

2. 種屬差異考量

小鼠模型：

優(yōu)點：成本低，基因工具豐富

缺點：肝臟生理與人類存在差異

3.大鼠模型：

優(yōu)勢：采血量多，更適合長期研究

代表：Zucker fatty大鼠

非人靈長類：

價值：最接近人類生理

局限：倫理和成本問題

4）NAFLD/NASH關鍵評價指標體系

1. 基礎表型評價

代謝參數(shù)：

體重增長曲線

空腹血糖和胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)

血清脂質譜(TC、TG、LDL-C/HDL-C)

肝功能指標：

ALT/AST比值

ALP和GGT水平

血清白蛋白和膽紅素

2. 組織學評價標準

NAFLD活動度評分(NAS)：

脂肪變性(0-3分

小葉炎癥(0-3分)

肝細胞氣球樣變(0-2分)

診斷閾值：NAS≥5分可診斷NASH

纖維化分期：

天狼星紅染色定量分析

Ishak或METAVIR評分系統(tǒng)

α-SMA免疫組化(肝星狀細胞活化)

3. 分子標志物分析

炎癥相關：

TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表達

F4/80免疫染色(巨噬細胞浸潤)

CCR2+單核細胞流式分析

纖維化相關：

Collagen I/III、α-SMA mRNA

TIMP-1/MMP-2比值

TGF-β/Smad通路蛋白

代謝相關：

SREBP-1c/FASN(脂肪合成)

PPARα/CPT1(脂肪酸氧化)

IRS-1/PI3K/Akt(胰島素信號)

5）實驗設計的核心要點

1. 標準化操作流程

樣本采集：

固定時間點(上午8-10點)

禁食處理(6小時)

肝臟分區(qū)域取樣(左葉/右葉)

組織處理：

OCT包埋(冰凍切片)

4%多聚甲醛固定(石蠟切片)

速凍保存(-80℃)

2. 質量控制關鍵點

模型驗證：

設立中間時間點(如4、8、12周)

預實驗確定最佳干預窗口

病理學雙盲評估

數(shù)據(jù)分析：

代謝籠監(jiān)測能量消耗

Micro-CT評估體脂分布

高通量測序數(shù)據(jù)驗證

3. 轉化醫(yī)學考量

臨床相關性：

選擇與人類NASH組織學相似的模型

關注臨床可檢測的生物標志物

考慮性別差異(雄性更易造模)

藥物測試規(guī)范：

設立預防性和治療性給藥組

監(jiān)測藥物對代謝參數(shù)的影響

多時間點動態(tài)評估療效

6）常見問題解決方案

1. 造模失敗排查

脂肪變性不明顯：

檢查飼料儲存條件(避免氧化)

確認動物品系敏感性

延長造模時間

炎癥反應不足：

增加飲食中膽固醇含量(1-2%)

結合低劑量CCL4刺激

改用MCD或HFHFrHC飲食

2. 數(shù)據(jù)變異控制

組內差異大：

嚴格統(tǒng)一動物周齡(±3天)

控制飼養(yǎng)環(huán)境(溫度、光照周期)

同批次飼料喂養(yǎng)

病理評分不一致：

采用數(shù)字化病理分析系統(tǒng)

至少兩位病理學家雙盲評分

建立實驗室內部評分標準

7）前沿模型發(fā)展方向

1. 類器官與微生理系統(tǒng)

肝臟類器官模型：

3D培養(yǎng)技術

患者來源個性化模型

藥物毒性測試應用

器官芯片技術：

模擬肝臟微環(huán)境

多器官相互作用研究

實時監(jiān)測細胞反應

2. 基因編輯新模型

CRISPR-Cas9定制模型：

特定基因突變引入

人類疾病等位基因敲入

條件性基因表達調控

人源化肝臟小鼠：

FRG小鼠模型

嵌合肝研究平臺

人類病原體感染研究

結論：建立標準化研究范式

選擇合適的NAFLD/NASH動物模型需要綜合考慮研究目的、疾病階段、種屬特點和轉化價值。建議研究者：

①根據(jù)科學問題選擇最匹配的模型系統(tǒng)

②建立多層次評價指標體系

③實施標準化操作流程和質量控制

關注模型與人類疾病的臨床相關性

通過系統(tǒng)化的實驗設計和嚴謹?shù)脑u價方法，可顯著提高NAFLD/NASH研究的可靠性和轉化潛力，為開發(fā)新型治療策略提供堅實基礎。

選擇 [普拉特澤生物] 的理由：

▲豐富的模型選擇： 我們提供多種肝纖維化模型，滿足您不同的研究需求。

▲專業(yè)的服務團隊： 我們的團隊擁有豐富的經(jīng)驗，可為您提供專業(yè)的模型選擇、實驗設計和數(shù)據(jù)分析服務。

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