植物組織的培養(yǎng)方法【細(xì)胞實驗外包】
2022-08-17 15:47:45
來源/作者：普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺
植物組織培養(yǎng)方法由普拉特澤生物——細(xì)胞實驗平臺總結(jié)分享。細(xì)胞的培養(yǎng)是所有細(xì)胞實驗操作的基礎(chǔ)，分化、培養(yǎng)出健康的細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)三個研究領(lǐng)域都舉足輕重的重要，普拉特澤生物細(xì)胞實驗平臺專業(yè)承接幾十種細(xì)胞實驗，技術(shù)們在各種細(xì)胞實驗的操作中身經(jīng)百戰(zhàn)，細(xì)胞培養(yǎng)方面技能點早已點滿，今天咱們就來分析分析——植物組織培養(yǎng)的介紹與詳細(xì)步驟！
上期我們講完了動物細(xì)胞原代與傳代培養(yǎng)的詳細(xì)步驟，可以跟植物細(xì)胞的培養(yǎng)步驟對比記憶，記得更深哦，鏈接奉上，溫故而知新哦：
《 動物細(xì)胞原代培養(yǎng)……………………………………實操步驟》
《動物細(xì)胞傳代培養(yǎng)……………………………………實操步驟》
老生常談了，要學(xué)習(xí)一個東西我們要從是什么、為什么、怎么做、三個方面來了解。
一、什么是植物組織培養(yǎng)呢？
植物組織培養(yǎng)是在離體條件下，將愈傷組織或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中進(jìn)行震蕩培養(yǎng)，得到分散成游離的懸浮細(xì)胞，通過繼代培養(yǎng)使細(xì)胞增殖，從而獲得大量細(xì)胞群體的一種技術(shù)。
一、為什么要分離培養(yǎng)植物組織或細(xì)胞？
1、植物細(xì)胞的培養(yǎng)在研究細(xì)胞的增殖、分化、代謝、運動、衰老、死亡等方面都是重要的研究手段，且是細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、起源、基因表達(dá)與調(diào)控方面的基礎(chǔ)研究條件。
2、可以從植物細(xì)胞培養(yǎng)中獲得香料、藥品、食品添加劑。
3、擴(kuò)大了植物繁殖途徑，便于無性微繁體系的保存，對珍惜瀕危物種保護(hù)有重大意義，有利于種子繁殖率低的植物的保護(hù)，便于工廠化生產(chǎn)等
三、植物組織培養(yǎng)應(yīng)該怎么做？
1、外植體的選擇和預(yù)處理
（1）外植體：外植體是指從植物體上取出的用于無菌培養(yǎng)或直接分離細(xì)胞的部分植物組織或器官，我們可以從植物體的各個部位都可以成功地獲得植物細(xì)胞，但是不同植物、不同器官的脫分化和再分化能力不同，分離細(xì)胞和原生質(zhì)體的難易和效果也有很大差異。
（2）無菌和消毒:通常應(yīng)當(dāng)選擇生長正常、無病蟲害的植株，并從中選擇適宜的組織器官作為外植體，主要包括：
l 莖尖、莖段及葉片的消毒處理
l 果實及種子的消毒處理
l 根及地下貯藏器官等的消毒處理
l 花藥的消毒處理
l 外植體的其他處理
2、愈傷組織的形成和形態(tài)發(fā)生
植物細(xì)胞的全能性在發(fā)育和分化的過程中并不會喪失，但在完整的植株中每個細(xì)胞都是組織的一員。幾乎所有高等植物細(xì)胞，一旦脫離了母體植株，擺脫了原來所受到的遺傳上的控制和生理上的制約，在不定期下的培養(yǎng)條件下，就會發(fā)生一種回復(fù)變化，從而失去分化狀態(tài)，變?yōu)榉稚?xì)胞，實現(xiàn)脫分化過程。
然后，這些脫分化細(xì)胞經(jīng)過連續(xù)的有絲分裂，形成愈傷組織，愈傷組織的形成主要分為誘導(dǎo)期、分裂期、形成期三個時期。
3、愈傷組織的繼代培養(yǎng)
脫分化細(xì)胞不斷進(jìn)行分裂，從而形成了愈傷組織，愈傷組織在培養(yǎng)基上生長一段時間以后，由于營養(yǎng)物質(zhì)枯竭，水分散失，以及代謝產(chǎn)物的積累，必須轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上培養(yǎng)。這個過程叫做繼代。
通過繼代培養(yǎng)，可使愈傷組織無限期地保持在不分的增殖狀態(tài)。然而，如果讓愈傷組織留在原培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)而不繼代，它們則不可避免地發(fā)生分化，產(chǎn)生新的結(jié)構(gòu)。
4、愈傷組織的生長
脆的愈傷組織是進(jìn)行懸浮培養(yǎng)最適合的材料，稍經(jīng)機械振蕩即可使組織分散成單細(xì)胞或少數(shù)幾個細(xì)胞組成的小細(xì)胞團(tuán)。在培養(yǎng)中細(xì)胞產(chǎn)生迅速增殖，而堅實的愈傷組織中的細(xì)胞間被果膠質(zhì)緊緊地粘著，因而往往不能形成良好的懸浮系統(tǒng)。
一般愈傷組織的增殖生長只發(fā)生在不與瓊脂接觸的表面，而與瓊脂接觸的一面極少細(xì)胞增殖，只是細(xì)胞分化形成緊密的組織塊。它是愈傷組織表面或近表面瘤狀物生長的結(jié)果。
愈傷組織之間的質(zhì)地有顯著不同，有的很松脆，有的很堅實，且這兩類愈傷組織可互相轉(zhuǎn)變。其方法是:加入高濃度的生長物質(zhì)，可使堅實的愈傷組織變?yōu)樗纱唷７粗?，減低或除去生長物質(zhì)，則松脆的愈傷組織可以轉(zhuǎn)變?yōu)閳詫崱?/span>
5、愈傷組織形態(tài)的調(diào)控
來源于不同植物或同一種植物不同部們的愈傷組織，在顏色、結(jié)構(gòu)和生長習(xí)性上都可能存在差異，其遺傳生理功能也可能或是具有胚性，或是不具胚性，在不同的實驗中由于目的的不同，對愈傷組織狀態(tài)的要求也不完全相同，但優(yōu)良的愈傷組織通常必須具備以下4個特性中的2-3個：
（1）高度的胚性或再分化能力，以便從這些愈傷組織得到再生植物。
（2）容易散碎，以便用這些愈傷組織建立優(yōu)良的懸浮系，并且在需要時能從中分離出全能性的原生質(zhì)體。
（3）旺盛的自我增殖能力，以便用這些愈傷組織建立大規(guī)模的愈傷組織無性系。
（4）經(jīng)過長期繼代保存而不喪失胚性，有便有可能對它們進(jìn)行各種遺傳操作。細(xì)胞和愈傷組織的形態(tài)發(fā)生，主要受外植體本身、培養(yǎng)基和培養(yǎng)環(huán)境等三大類因素的調(diào)控。
好啦，那關(guān)于植物組織培養(yǎng)的詳細(xì)方法就介紹到這里啦，共細(xì)胞培養(yǎng)的小白們簡單參考，如果您有細(xì)胞培養(yǎng)或細(xì)胞實驗代做的需求與技術(shù)需要咨詢，歡迎留言和細(xì)胞實驗平臺的技術(shù)溝通哦！
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
微信關(guān)注公眾號
湘公網(wǎng)安備