免疫組化和免疫熒光有什么區(qū)別?
來源/作者:普拉特澤-病理染色技術(shù)平臺
大家好,今天普拉特澤生物跟大家一起來學(xué)習(xí)一下——免疫組化和免疫熒光的區(qū)別,兩種實(shí)驗(yàn)技術(shù)都是我們病理分析時常用的技術(shù)手段,那它們有哪些區(qū)別和不同呢?來跟著普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺的技術(shù)詳細(xì)看看吧。
免疫組化與免疫熒光兩者都是蛋白定位的檢測(也就是確定蛋白是表達(dá)在細(xì)胞核/漿/膜)。
其區(qū)別是:
1、概念和基本原理
免疫組織化學(xué)又稱免疫細(xì)胞化學(xué),是指帶顯色劑標(biāo)記的特異性抗體在組織細(xì)胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學(xué)的呈色反應(yīng),對相應(yīng)抗原進(jìn)行定性、定位、定量測定的一項(xiàng)新技術(shù)。它把免疫反應(yīng)的特異性、組織化學(xué)的可見性巧妙地結(jié)合起來,借助顯微鏡的現(xiàn)象和放大作用,在細(xì)胞、亞細(xì)胞水平檢測各種抗原物質(zhì),并可在原位顯示相應(yīng)的基因和基因表達(dá)產(chǎn)物。免疫組織化學(xué)技術(shù)現(xiàn)已有:免疫熒光組織(細(xì)胞)化學(xué)技術(shù)、免疫酶組織(細(xì)胞)化學(xué)技術(shù)、親和組織化學(xué)技術(shù)、免疫金銀及鐵標(biāo)記免疫組織化學(xué)技術(shù)等。
免疫熒光組織(細(xì)胞)化學(xué)技術(shù)是采用熒光素標(biāo)記的已知抗體(或抗原)作為探針,檢測待測組織、細(xì)胞標(biāo)本中的靶抗原(或抗體),形成的抗原抗體復(fù)合物上帶有熒光素,在熒光顯微鏡下,由于受高壓汞燈光源的紫外光照射,熒光素發(fā)出明亮的熒光,這樣就可以分辨出抗原(或抗體)的所在位置及其性質(zhì),并可利用熒光定量技術(shù)計(jì)算抗原的含量。以達(dá)到對抗原物質(zhì)定位、定性、定量測定的目的。
2、標(biāo)本制作:
免疫熒光一般用冰凍切片,減少雜質(zhì)干擾;而酶免疫組化一般用石蠟切片或冰凍切片均可以。
3、實(shí)驗(yàn)步驟:免疫熒光染色步驟簡單,而酶免疫組化方法較為復(fù)雜,多了 DAB 顯色過程。
4、染色后的標(biāo)本保存:免疫熒光染色后的標(biāo)本一般短時間拍照,時間長了熒光衰退;而酶免疫組化染色標(biāo)本可以長期保存。
5、免疫組化結(jié)果除了知道蛋白是在細(xì)胞漿還是細(xì)胞膜表達(dá)高些,還可以用軟件做相對定量分析。
6、免疫熒光得到的圖片是彩色的,漂亮一些適合觀察。
好啦,免疫組化和免疫熒光的區(qū)別我們就講到這里啦,區(qū)別很多歡迎補(bǔ)充,需要免疫組化代做與免疫熒光實(shí)驗(yàn)代做的話,歡迎留言技術(shù)會第一時間給到回復(fù)的哦~