什么是免疫熒光技術(shù)?【附視頻教程】
來源/作者:普拉特澤-病理染色技術(shù)平臺
普拉特澤生物今天帶大家來學(xué)習(xí)一個新的實(shí)驗——免疫熒光實(shí)驗技術(shù),也就是我們常說的IF實(shí)驗。免疫熒光又稱熒光抗體技術(shù),是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種,是在免疫學(xué)、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù),更是普拉特澤生物病理實(shí)驗平臺分析檢測中的常規(guī)實(shí)驗手段,承接的多例免疫熒光實(shí)驗外包也給我們積累了豐富的經(jīng)驗與多種組織樣本案例,歡迎咨詢哦~
話不多說,來看看什么是免疫熒光技術(shù)吧!
免疫熒光技術(shù)是以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位的技術(shù)。用熒光抗體示蹤或檢查相應(yīng)抗原的方法稱熒光抗體法;用已知的熒光抗原標(biāo)記物示蹤或檢查相應(yīng)抗體的方法稱熒光抗原法。這兩種方法總稱免疫熒光技術(shù),因為熒光色素不但能與抗體球蛋白結(jié)合,用于檢測或定位各種抗原,也可以與其他蛋白質(zhì)結(jié)合,用于檢測或定位抗體,但是在實(shí)際工作中熒光抗原技術(shù)很少應(yīng)用,所以人們習(xí)慣稱為熒光抗體技術(shù),或稱為免疫熒光技術(shù)。用免疫熒光技術(shù)顯示和檢查細(xì)胞或組織內(nèi)抗原或半抗原物質(zhì)等方法稱為免疫熒光細(xì)胞(或組織)化學(xué)技術(shù)。
免疫熒光技術(shù)的原理是:免疫學(xué)的基本反應(yīng)是抗原-抗體反應(yīng)。由于抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性,所以當(dāng)抗原抗體發(fā)生反應(yīng)時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術(shù)就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標(biāo)記在抗體(或抗原)上,與其相應(yīng)的抗原(或抗體)結(jié)合后,在熒光顯微鏡下呈現(xiàn)一種特異性熒光反應(yīng)。
那這么常用的免疫熒光有什么優(yōu)缺點(diǎn)呢?
免疫熒光的主要優(yōu)點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、敏感性高、速度快;缺點(diǎn)是:非特異性染色問題尚未完全解決,結(jié)果判定的客觀性不足,技術(shù)程序也還比較復(fù)雜。
免疫熒光的分類主要有:
⑴ 熒光抗體技術(shù)
抗原抗體反應(yīng)后,利用熒光顯微鏡判定結(jié)果的檢測方法。
⑵ 免疫熒光測定
抗原抗體反應(yīng)后,利用特殊儀器測定熒光強(qiáng)度而推算被測物濃度的檢測方法。
那么免疫熒光技術(shù)有哪些臨床診斷上的意義呢?
1、直接免疫熒光技術(shù)臨床意義
(1)細(xì)胞間熒光提示天皰瘡。
(2)基底膜熒光帶:在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、盤狀紅斑狼瘡的皮損,均可見顆粒狀的以IgG為主的帶狀分布。在類天皰瘡為線狀的以IgG為主的帶狀分布。
(3)在真皮內(nèi)血管壁見到圈狀熒光提示血管炎。
2、間接免疫熒光技術(shù)臨床意義
(1)風(fēng)濕性結(jié)締組織?。杭t斑狼瘡、硬皮病、干燥綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等。
(2)增生性疾?。焊咔虻鞍籽Y性紫癜、巨球蛋白血癥、淋巴瘤、慢性白血病、癌腫等。
(3)感染性疾?。航Y(jié)核病、瘤型麻風(fēng)、組織胞漿菌病。
抗核抗體本身并非特異,滴度和核型對診斷也有重要參考價值。因此除定性外,還應(yīng)結(jié)合滴度、核型及臨床體征才具有較大價值。
3、補(bǔ)體結(jié)合法
常用來檢測患者的自身抗體,如妊娠皰疹患者。
好啦,免疫熒光技術(shù)我們就介紹到這里啦,深入視頻學(xué)習(xí)請點(diǎn)擊:《IF/免疫熒光》還有更多不懂得問題或有免疫熒光代做外包的需求歡迎隨時留言,我們會一個一個耐心回復(fù)的,下期內(nèi)容給大家介紹免疫熒光的操作步驟,咱們下期見!