免疫組化實(shí)驗(yàn)技術(shù)介紹【科研人入】
來(lái)源/作者:普拉特澤-生物醫(yī)學(xué)整體課題外包平臺(tái)
今天普拉特澤生物跟大家一起學(xué)習(xí)的實(shí)驗(yàn)就是免疫組化。免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對(duì)其進(jìn)行定位、定性及相對(duì)定量的研究。普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺(tái)專業(yè)承接免疫組化實(shí)驗(yàn)代做,提供優(yōu)質(zhì)、真實(shí)的病理檢測(cè)服務(wù)。
免疫組化技術(shù)的基本原理是利用抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性,免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái),以此作為抗原或半抗原,通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體,再以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無(wú)色的,因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來(lái),以期達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性,定位或定量的研究。
那么為什么免疫組化我們用的這么多呢?它有哪些臨床上不可代替的作用呢:
(1)惡性腫瘤的診斷與鑒別診斷;
(2)確定轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤的原發(fā)部位;
(3)對(duì)某類腫瘤進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型;
(4)軟組織腫瘤的治療一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類,因其種類多、組織形態(tài)相像,有時(shí)難以區(qū)分其組織來(lái)源,應(yīng)用多種標(biāo)志進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織腫瘤的診斷是不可缺少的;
(5)發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶,有助于臨床治療方案的確定,包括手術(shù)范圍的確定。
(6)為臨床提供治療方案的選擇。
免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等,這些常用免疫組織化學(xué)方法的原理如下:
1. 免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
將已知抗體標(biāo)上熒光素,以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原,在熒光顯微鏡下觀察.當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光,從而可以確定組織中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)
是免疫組織化學(xué)研究中最常用的技術(shù).基本原理是先以酶標(biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒,通過(guò)光鏡或電鏡,對(duì)細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原進(jìn)行定位或定性研究.
3. 免疫膠體金技術(shù)
就是用膠體金標(biāo)記一抗,二抗或其他的能特異性的結(jié)合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作為探針對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性,定位或定量研究.由于膠體金的電子密度高,多用于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記的定位研究。
免疫組化實(shí)驗(yàn)看似容易,但真想把它做好,還是需要花上很長(zhǎng)一段時(shí)間去積累和摸索經(jīng)驗(yàn)。如果還有不懂的同學(xué)歡迎隨時(shí)留言,一起學(xué)習(xí)進(jìn)步哦!