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        今天普拉特澤給大家介紹一個新的實驗——彗星實驗（單細胞凝膠電泳實驗）。彗星實驗介紹由普拉特澤生物細胞實驗平臺為大家總結分享，文末附有彗星實驗的視頻教程供大家學習，一起來看看吧。

        彗星實驗，亦稱單細胞凝膠電泳實驗。是指一種通過檢測DNA鏈損傷判斷遺傳毒性的技術，是一種在單細胞水平檢測DNA損傷程度的方法。在載玻片上用少量瓊脂糖凝膠包埋單個分散細胞，細胞經裂解、解旋和電泳后，斷裂的DNA在電場力作用下向陽極移動，經熒光染料染色，在熒光顯微鏡下觀察彗星樣圖像。

        彗星實驗是一種有效評估DNA損傷的方法。其原理是器官或組織經處理（如輻射、重金屬等）后，細胞中的DNA發(fā)生單鏈或雙鏈斷裂，經細胞及其核膜裂解后，DNA解旋，在電場作用下，DNA 斷片遷移出細胞核，形成彗星狀的電泳圖譜。

        它能有效地檢測并定量分析細胞中DNA單、雙鏈缺口損傷的程度。當各種內源性和外源性DNA損傷因子誘發(fā)細胞DNA鏈斷裂時，其超螺旋結構受到破壞，在細胞裂解液作用下，細胞膜、核膜等膜結構受到破壞，細胞內的蛋白質、RNA以及其他成分均擴散到細胞裂解液中，而核DNA由于相對分子質量太大只能留在原位。在中性條件下，DNA片段可進入凝膠發(fā)生遷移，而在堿性電解質的作用下，DNA發(fā)生解螺旋，損傷的DNA斷鏈及片段被釋放出來。由于這些DNA的相對分子質量小且堿變性為單鏈，所以在電泳過程中帶負電荷的DNA會離開核DNA向正極遷移形成彗星狀圖像，而未受損傷的DNA部分保持球形。

        DNA受損越嚴重，產生的斷鏈和斷片越多，長度也越小，在相同的電泳條件下遷移的DNA量就越多，遷移的距離就越長。通過測定DNA遷移部分的光密度或遷移長度就可以測定單個細胞DNA損傷程度，從而確定受試物的作用劑量與DNA損傷效應的關系。該法對檢測低濃度遺傳毒物具有高靈敏性，有研究的細胞不需處于有絲分裂期，而且只需要少量細胞的優(yōu)點。

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