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        細(xì)胞增殖檢測(cè)方法匯總由普拉特澤生物細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)總結(jié)分享，文末附上細(xì)胞增殖檢測(cè)視頻教程供大家復(fù)盤(pán)學(xué)習(xí)。上篇我們介紹了什么是細(xì)胞增殖，簡(jiǎn)單梳理了一下細(xì)胞增殖的有絲分裂、無(wú)絲分裂、減數(shù)分裂三種分裂形式，忘記了回去復(fù)習(xí)哦，今天實(shí)驗(yàn)平臺(tái)的技術(shù)為大家總結(jié)的是細(xì)胞增殖檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)方法。

         細(xì)胞增殖檢測(cè)法（一）：直接計(jì)數(shù)法

         這是一種非常簡(jiǎn)單的檢測(cè)方法，我們可以利用計(jì)數(shù)板或技術(shù)儀得出細(xì)胞數(shù)目然后對(duì)數(shù)目進(jìn)行比較即可。其缺點(diǎn)是不適合評(píng)估特定亞群、和數(shù)量較多的細(xì)胞計(jì)數(shù)。

         細(xì)胞增殖檢測(cè)法（二）：直接Brdu/EdU檢測(cè)法

          Brdu中文全名5-溴脫氧尿嘧啶核苷，為胸腺嘧啶的衍生物，可代替胸腺嘧啶在DNA合成期（S期），活體注射或細(xì)胞培養(yǎng)加入，而后利用抗Brdu單克隆抗體，ICC染色，顯示增殖細(xì)胞。同時(shí)結(jié)合其它細(xì)胞標(biāo)記物，雙重染色，可判斷增殖細(xì)胞的種類，增殖速度，對(duì)研究細(xì)胞動(dòng)力學(xué)有重要意義。

          細(xì)胞增殖檢測(cè)法（三）：直接MTT檢測(cè)法

          MTT檢測(cè)法主要反映細(xì)胞的能量代謝，是檢測(cè)細(xì)胞增殖活力的一種簡(jiǎn)便準(zhǔn)確的方法，其原理是在活細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖過(guò)程中，線粒體內(nèi)的脫氫酶可將黃色的MTT分解成蘭紫色的甲（Formazan），生成的甲瓚的多少與細(xì)胞的數(shù)量和細(xì)胞的活力成正比。

          細(xì)胞增殖檢測(cè)法（四）：CCK-8檢測(cè)法

          CCK-8就是MTT的升級(jí)版，CCK-8細(xì)胞活性檢測(cè)試劑中含有WST-8——一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以為線粒體內(nèi)的脫氫酶驗(yàn)明正身，在脫氫酶作用下，還原生成橙黃色的甲瓚產(chǎn)物。細(xì)胞增殖越多越快，則顏色越深；細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。

          細(xì)胞增殖檢測(cè)法（五）：直接3H-TdR滲入法

          胸腺嘧啶核苷（TdR）是DNA特有的堿基，也是DNA合成的必需物質(zhì)。用同位素3H標(biāo)記TdR即3H-TdR作為DNA合成的前體能摻入DNA合成代謝過(guò)程，那之后的每一條新合成的DNA雙鏈像被安裝了GPS定位器一樣，都能被液體閃爍計(jì)數(shù)器檢測(cè)到，通過(guò)測(cè)定細(xì)胞的放射性強(qiáng)度，可以反映細(xì)胞DNA的代謝及細(xì)胞增殖情況。優(yōu)點(diǎn)：3H-TdR摻入法敏感性高，客觀性強(qiáng)，重復(fù)性好。缺點(diǎn)：需一定設(shè)備條件：液體閃爍計(jì)數(shù)器，這玩意不便宜，同時(shí)還存在放射性核素污染問(wèn)題，真是傷錢包又傷身體。

          細(xì)胞增殖檢測(cè)法（六）：核抗原Ki‐67染色法

           Ki-67染色，研究人員可以評(píng)估處于細(xì)胞周期所有活躍期的總增殖細(xì)胞的百分比?？蒲腥藛T可以借此觀察藥物或未知化合物的刺激效應(yīng)或抗增殖效應(yīng)?？捎妹庖呓M織化學(xué)技術(shù)或流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。

          細(xì)胞增殖檢測(cè)法（七）：CFSE檢測(cè)法

           羥基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺脂（CFSE）是一種可穿透細(xì)胞膜的熒光染料，可以不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，是一種良好的細(xì)胞標(biāo)記物。其檢測(cè)法原理：CFSE進(jìn)入細(xì)胞后，可以不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上。當(dāng)細(xì)胞分裂時(shí)，CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，因此其熒光強(qiáng)度是在親代細(xì)胞的一個(gè)增殖的細(xì)胞群中，各連續(xù)代細(xì)胞的熒光強(qiáng)度呈對(duì)遞減，利用流式細(xì)胞儀在488nm激發(fā)光和熒光檢測(cè)通道可對(duì)其進(jìn)行分析。

           好啦，那檢測(cè)細(xì)胞增殖的實(shí)驗(yàn)方法我們就介紹到這里啦，視頻學(xué)習(xí)點(diǎn)擊《細(xì)胞實(shí)驗(yàn)》如果你還知道更多檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法歡迎留言，我們會(huì)一個(gè)一個(gè)補(bǔ)充上的哦，有需要細(xì)胞增殖檢測(cè)的老師也請(qǐng)一定要選擇普拉特澤生物！