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         大家好！今天普拉特澤生物繼續(xù)帶大家一起學(xué)習(xí)新實(shí)驗(yàn)——油紅O染色實(shí)驗(yàn)，油紅O染色是一種用于檢測脂肪油滴的染色方法。它的原理基于油紅O染料與脂肪油滴之間的親和性。普拉特澤生物病理實(shí)驗(yàn)平臺長期為大家提供紅油O染色代做外包服務(wù)，本文跟大家分享油紅O染色實(shí)驗(yàn)指南。


實(shí)驗(yàn)原理

油紅O是很強(qiáng)的脂溶劑和染脂劑，較易與甘油三脂結(jié)合呈小脂滴狀，與磷脂結(jié)合力稍差。其染色原理一般認(rèn)為是物理上的溶液作用或吸附作用，借溶液作用使脂肪染色。染料在冰凍切片內(nèi)脂質(zhì)的溶解度較在原溶劑中的溶解度更大，所以在染色時(shí)染料就從有機(jī)溶劑轉(zhuǎn)移入脂質(zhì)而使脂肪染色。脂肪的陽性染色結(jié)果呈橘黃至紅色，具體顏色因脂質(zhì)濃度而定。因此，油紅O染色方法可用于檢測組織或細(xì)胞中脂肪油滴的存在和數(shù)量，尤其適用于脂質(zhì)代謝疾病的研究。

如果您想進(jìn)行油紅O染色實(shí)驗(yàn)，以下是一些指南：

        準(zhǔn)備標(biāo)本：您可以選擇使用細(xì)胞或組織樣本。確保您的樣本是新鮮的，保存在冰箱或液氮中。

        固定標(biāo)本：將樣本用4％的多聚甲醛或其他合適的固定劑進(jìn)行固定，保證固定劑濃度充足并確保完全固定。

        化學(xué)處理：將固定的標(biāo)本進(jìn)行化學(xué)處理，以去除其內(nèi)部的脂質(zhì)和其他物質(zhì)。其中的一種方法是將樣本用80％的乙醇浸泡24小時(shí)。

 
        染色：在油紅O染色液中將標(biāo)本浸泡，時(shí)間可以根據(jù)需要自行決定，一般在30分鐘至2小時(shí)之間。將標(biāo)本移入去離子水或其他適合的緩沖液中沖洗，使其達(dá)到理想的染色效果。

        顯微鏡檢查：將標(biāo)本放在顯微鏡下檢查。您應(yīng)該能夠看到樣本中的脂肪油滴，它們應(yīng)該呈現(xiàn)出紅色。

        請注意，油紅O染色實(shí)驗(yàn)不僅適用于脂肪的檢測，也可以用于一些其他的實(shí)驗(yàn)和研究。

        接下來我們具體看看是怎樣的實(shí)驗(yàn)步驟，以c57小鼠的肝臟組織為例，將實(shí)驗(yàn)分為對照組和高脂模型組

 對照組      

模型組

將得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)論

中性脂肪：橙紅色或橘紅色

細(xì)胞核：藍(lán)色

具體的實(shí)驗(yàn)步驟

        1、冰凍切片厚度6～10μm，不固定或10%福爾馬林固定10min后水洗。

        2、切片入蒸餾水中稍沖洗。

        3、切片入70%的乙醇內(nèi)浸洗20～30s。

        4、切片入改良油紅O染色液中(加蓋)，密閉染色10～15min。

        5、分色：入70%的乙醇內(nèi)稍洗以便去除染液。

        6、入蒸餾水中稍微清洗。

        7、Mayer蘇木素染色液復(fù)染核1～2min。

        8、(可選)1%的鹽酸溶液稍微分化一下。

        9、(可選)自來水漂洗10min 或稀碳酸鋰溶液中促藍(lán)。

       10、入蒸餾水中稍微清洗。

       11、用濾紙吸干周圍水分。

       12、甘油明膠或阿拉伯糖膠封固。

       13、采圖。（染色結(jié)果不能長期保存，應(yīng)盡快觀察及照相）

今天關(guān)于紅油O染色的實(shí)驗(yàn)指南就分享到這兒啦~如果您在實(shí)驗(yàn)過程中遇到技術(shù)問題，或者需要實(shí)驗(yàn)外包和代做，可與我們技術(shù)老師聯(lián)系：18570028002（微信同號）