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實驗介紹
【技術原理】
1、CFSE（CFDA-SE） 是一種可對活細胞進行熒光標記的新型染料，可以標記活體細胞。CFDA-SE是一種帶有琥珀酰亞胺(NHS)的熒光染料，可以結合細胞內(nèi)的蛋白質。CFDASE在結構上將酚羥基部位改造成AM體，所以自身不發(fā)熒光，熒光背景低，脂溶性高，能夠輕易穿透細胞膜，進入細胞內(nèi)的CFDA-SE的AM 部位能被細胞內(nèi)酯酶水解生成CFSE，通過共價結合賴氨酸側鏈的氨基而摻入細胞內(nèi)和細胞表面的蛋白，且結合后發(fā)出強的綠色熒光。細胞分裂增殖過程中，它的熒光強度會隨著細胞的分裂而逐級遞減，標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，因此其熒光強度是親代細胞的一半。CFSE的琥珀酰亞胺(NHS)和細胞內(nèi)蛋白質的氨基部位結合，固定在細胞內(nèi)，不會漏出細胞外。CFSE進入細胞后定位于細胞膜、細胞質和細胞核，在細胞核的熒光最強。
2、BrdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物。它也能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復制的DNA分子，通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應檢測DNA復制活性，通過檢測EdU標記便能準確地反映細胞的增殖情況。
【實驗流程】
CFSE：加入CFSE-孵育-洗滌-培養(yǎng)-上機
BrdU：加入BrdU-孵育-洗滌-培養(yǎng)-上機
案例展示
送檢與交付標準
| 樣品類型 | 樣品需求 | 運輸條件 |
|---|---|---|
| 組織 | 離體后組織制成單細胞懸液，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 活細胞 | 樣本量：1*106個細胞/TEST，加入PBS培養(yǎng)基內(nèi) | 常溫運輸 |
| 血液 | 將血液采集在EDTA肝素鈉的抗凝采血管內(nèi) | 常溫運輸 |
電話：400-691-6686
在線時間：8:00-24:00
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